一、实验概念

免疫印迹（immunoblotting）又称蛋白质印迹（Western blotting），是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。结合化学发光检测，可以同时比较多个样品同种蛋白的表达量差异。Western Blot方法成熟，大多实验室均具备Western Blot的实验能力，但要得到一份背景清晰、条带明亮、真实客观的实验结果需要丰富的实践经验，我们技术人员在样品处理、转膜和抗体稀释比例等操作上具有丰富的操作经验，能够在短时间内为客户优化实验条件，提供客观真实的实验结果。

二、实验流程：

客户提供样本及靶蛋白抗体→蛋白样本抽取及定量→上样→电泳→转膜→封闭→抗体孵育显色→胶片灰度分析数据处理

三、实验结果示例：

四、注意事项：

1.组织样本，离体后尽快冻存。

2.有条件的话，最好先将样本在液氮中速冻，再转入-80℃冰箱中保存。干冰运输。

3.对于心肝脾肾等组织可每50~100mg加1ml裂解液，肺100~200mg加1mg裂解液。加入裂解液前，尽量将组织剪成小块。

4.少量指标，组织需要提供的样本量要求50mg或更多；细胞样本需要提供六孔板一个孔的细胞量或更多。

5.客户可提供目标蛋白一抗（我司可代购）

6.我司可免费提取蛋白、提供二抗、免费内参，如GAPDH，β-actin等

7.出具实验报告，提供原始膜图片、带基础分析