数字PCR（Digital PCR，dPCR）实验介绍

原理：是一种近年来兴起的核酸分子绝对定量分析技术，数字PCR的面世解决了多年来qPCR一直没有解决的问题，首先是数字PCR检测灵敏度极高，可以检测单个核酸分子，另外就是数字PCR并不依赖标准曲线的绝对定量。数字PCR系统可将PCR反应体系均匀分割成数万个反应微滴，每个微滴平行、独立完成PCR扩增，通过判定每个微滴扩增完成后荧光信号的有无进行统计，最后根据泊松分布公式计算得到原体系中靶标基因的初始浓度或拷贝数。数字PCR系统可应用在：肿瘤液体活检、无创产前诊断、病原微生物检测、病毒载量测定、拷贝数变异、稀有突变检测、基因相对表达研究、转基因检测、二代测序结果验证等领域。

荧光定量PCR&数字PCR(ddPCR)区别：

实验流程：

确认基因信息，制定实验方案----DNA/RNA提取，质检----探针设计合成----上机扩增，读取结果----分析实验结果----发送检测结果及数据分析

样本保存运输要求：

1，血液样品：抗凝血＞0.5 ml，样品采集后于-20°C 保存

2，动植物组织样品：新鲜组织（-80°C 保存）或石蜡包埋的组织或95%乙醇中固定的组织，大于100 mg

需要确认的信息如下：

1、具体检测什么样本?什么种属？

2、检测指标是哪些？  

3、是否提供阴性对照？  

4、探针和引物客户是否提供？