概念：

稳转株是指基于特定细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。用转染或病毒侵染等方法将构建好的含靶基因的载体导入细胞，然后根据载体中所携带的抗性标志选用相应的方法进行阳性克隆筛选，得到可稳定表达目的蛋白或者稳定沉默特定基因的细胞株。常用的真核表达载体抗性标志有新霉素（neomycin）、潮霉素（hygromycin）和嘌呤霉素（puromycin）。此外还可以通过稀释法或流式细胞术获取单细胞克隆。

原理与方法：

查阅筛选药物puro/G418/潮霉素等在目标细胞系中的使用剂量信息，设置浓度梯度进行预实验确定目标细胞系的增殖速度和最适给药条件。将目的基因导入细胞，于转染/病毒侵染细胞48h后开始加药处理，每天观察细胞增殖状态和培养基颜色，每3~5天换液一次。筛选1~2周后进行实验验证。